在特定實驗條件下檢測分子濃度、大小和相互作用是生物醫學、化學等研領域究的主要課題。熒光相關光譜(Fluorescence Correlation Spectroscopy;FCS)技術可在溶液中或單個活細胞內,以單分子分辨率,無需反應物分離提純(均相)、快速(數秒至數分鐘)檢測分子濃度、大小和相互作用等特性。
中科院生物物理所黃韶輝研究員團隊開發了目前全球市場上唯一一款整合了熒光自相關和交相關技術的桌面式熒光相關光譜儀(CorTectorTM SX100)。
CorTectorTM SX100可實現對多種熒光探針分子在10pM-500nM濃度區間的線性探測,并定量檢測分子大小(流體動力學半徑)和分子相互作用(離解常數)等特性。此外,CorTectorTM SX100的數據采集卡可輸出90ns分辨率的單光子時序信號,其激光器可實現交替激發(Alternating Laser Excitation; ALEX)。因此,CorTectorTM SX100 SX100還可用于溶液樣品的單分子熒光研究(i.e., Burst Analysis),包括無信號串擾的ALEX Single-Molecule FRET。此外,研究團隊還開發了熒光相關光譜顯微鏡分析模塊CorTectorTM CX100。該模塊可與任意倒置熒光顯微鏡對接,實現單個活細胞內的分子特性分析。傳統FCS實驗易受背景信號(散射光、內源熒光等)干擾。因此,項目團隊在皮秒脈沖激光單光子激發和時間相關單光子計數(TCSPC)探測基礎上,實現了基于時間分辨熒光光譜(TRFS)和熒光相關光譜(FCS)的整合光譜分析技術,比如熒光壽命相關光譜(Fluorescence Lifetime Correlation Spectroscopy;FLCS)。FLCS可有效去除血清樣品中的背景信號,從而實現對血清樣品中經熒光標記心衰標志物的(Alexa647-NT-proBNP)的線性、高敏(100pM-100nM)檢測。FLCS可進一步發展成為二維FLCS技術(2D-FLCS),該技術對復雜生物學問題(比如蛋白質折疊)的研究具重要應用價值。
講座內容:熒光相關光譜技術
講座時間:2020年5月15日(周五)10:00-11:30(報名截止時間5月14日12:00)
講座方式:線上培訓-騰訊會議(5月14日通過郵件發送講座鏈接)
主講人:黃韶輝 研究員 中國科學院生物物理研究所
主持人:李文奇 博士 蛋白質制備與鑒定平臺主管
聯系方式:changqing@tsinghua.edu.cn 常老師
報名方式:
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